Современные методы ускоренной диагностики туберкулеза
Эффективное применение различных бактериологических методов гарантирует:
► во-первых, своевременное выявление и изоляцию бактериовыделителей
►во-вторых, назначение правильного режима химиотерапии больным с лекарственно- устойчивыми формами заболевания
► во-третьих проведение соответствующих – противоэпидемичеких мероприятий в очагах инфекции.
За счет внедрения различных методов исследования лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза проводим как фенотипическую так и генотипические идентификации МТБ.
Фенотипические методы исследования лекарственной чувствительности, проводятся как прямым, так и непрямым способом на жидких и плотных питательных средах, методом пропорций.
Генотипические методы, основанные на выявлении мутаций в генах МБТ, ассоциированных с лекарственной устойчивостью.
Основой постановки диагноза туберкулеза обнаружение
в клиническом материале кислотоустойчивых микобактерий туберкулезного комплекса.
Однако чувствительность микроскопического исследования мокроты может составлять всего -40-50%,а наиболее информативным методом обнаружения МБТ являются культуральные исследования.
Левенштейна-Йенсена
До настоящего времени единственной средой для обнаружения микобактерий туберкулеза была плотная яичная среда Л-Йенсена на которой выделение клинических образцов составляло в среднем 2-3 месяца. И хотя посев
на эту среду был признан во всем мире « золотым стандартом», у этого метода довольно много недостатков оказывающих влияние на получение
результата.
Методика обработки
К исследуемому материалу в контейнере добавляем 4% щелочь закроем крышку флакона и встряхиваем, оставляем на 15 минут центрифугируем, удаляем надосадочную жидкость производим посев на среду Левенштейна-Йен-сена.
Помимо длительности получения результатов и довольно высоких затрат, а в век индустриального птицеводства оказалось невозможным стандартизировать методология приготовления яичных сред.
Самое главное препятствие разница в качестве яиц, полученных от кур с неодинаковым характером питания и содержания, отразившемся на качестве и размере желтка,
а следовательно и на ростовых качествах МБТ.
В основе предполагаемых экспресс методов является аппарат Бактек Миджит 960 по сравнению с плотной средой, принцип работы создание специальной жидкой среды на основе питательного бульона Мидлбрук с обогатительной добавкой супплимент для усиленного роста МБТ, раствора антибиотиков для предотвращения контаминации. И сокращение сроков получения роста культура на жидких питательных средах от 5 до 14 дней
Критерии направления больных с использованием прибора Бактек:
►Впервые выявленные больные до начала лечения
► больные с распространенным процессом.
►больные с рецидивами до начала лечения
► для контроля химиотерапии (при необходимости)
Метод Хайн тест применяется для быстрого диагностирования туберкулеза и определения устойчивости к препаратам первого и второго рядов, на мультиплексной ПРЦ в комбинации обратной гибридизацией с мембранными полосками, идентификация комплекса М туберкулеза и его резистентность к рифампицину и изониазиду в мокроте с положительным мазком.
Применяется для быстрого диагностирования туберкулеза в клинических материалах, а также для определения устойчивости к препаратам и первого и второго ряда путем определения мутаций в геноме микобактерий. Включает
в себя три стадии:
►Экстракцию ДНК
► амплификацию и
► гибридизацию
И все это проводится в течении –х суток.
Джин эксперт
Автоматизированный молекулярно- генетические метод, позволяет установить туберкулез и МЛУ ТБ,
за 2 часа, обладает высокой чувствительностью и существенно снижает сроки получения результатов диагностики ТБ и МЛУ, что обеспечивает своевременность эффективность лечения и инфекционный контроль.
► Автоматизирует обработку образцов, амплификацию ДНК и мультиплексную детекцию на основе ПЦР
► Работать с любыми образцами мокротой, мочой, СМЖ и плевральной жидкостью.
► Одновременно осуществлять скрининг на М. Туберкулеза и резистентность к рифампицину на95%
► Для работы используются одноразовые картриджи, содержащие все необходимые реагенты для проведения ПРЦ
►Закрытая крышка картриджа исключает контаминацию образцов, поэтому не требуется специальный бокс биологической безопасности
► Результаты теста выдаются через 2 часа и предоставляются в графическом, табличном и цифровом форматах
► Результаты каждого модуля отражаются в реальном времени.
► Информация о времени, оставшимся до получения результата 6 выводится на экран.
М.Кусемисова,
заведующий Клинико
бактериологической
лабораторией КГКП
«Областной
противотуберкулезный
диспансер»